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| Book/Report | FZJ-2019-00439 |
1995
Forschungszentrum Jülich GmbH Zentralbibliothek, Verlag
Jülich
Please use a persistent id in citations: http://hdl.handle.net/2128/21253
Report No.: Juel-3030
Abstract: 1. Für die Harnstoffdiffusion über die Cytoplasmamembran von Corynebacterium glutamicum wurde ein Permeabilitätskoeffizient von 8,5 x 10$^{-7}$ cm x s$^{-1}$ bestimmt. Dabei wurde sowohl die Permeabilität des Harnstoffs im Aufnahmeexperiment mit dem Wildtyp ATCC 13032 als auch im Effluxexperiment mit der isolierten Urease-negativen Mutante DMN 29 berücksichtigt. 2. Corynebacterium glutamicum verfügt über sekundäre Transportsysteme für Ammonium und Harnstoff, deren Expression stark reguliert wird und der "nitrogen control" unterliegt. Das Ammonium-Aufnahmesystem wird zusätzlich in seiner Aktivität durch den internen Glutaminpool reguliert. 3. Die Ammoniumaufnahme wird von einem Uniportsystem katalysiert. Da das protonierte Ammoniumion transportiert wird, stellt das Membranpotential eine treibende Kraft dar. Die Ammoniumaufnahme wurde mit Hilfe des Analogons Methylammonium gemessen. Es wurde ein K$_{m}$-Wert von 40 $\mu$M und eine V$_{max}$ von, je nach Induktionszustand, 15 bis 30 nmol x min$^{-1}$ x mg TG$^{-1}$ bestimmt. Bei Zugabe von Ammoniumionenist aufgrund einer starken Kompetition keine Methylammoniumaufnahme meßbar. Die Affinität des Transportsystems ist daher wahrscheinlich weit höher für Ammonium als für Methylammonium. 4. Das Membranpotential ist auch eine treibende Kraft des aktiven Harnstoff Transportsystems. Die Harnstoffaufnahme geschieht wahrscheinlich im Symport mit Protonen. Die Affinität des Systems ist mit einem K$_{m}$-Wert von 8 $\mu$M relativ hoch, während seine Geschwindigkeit mit einer V$_{max}$ von 2 bis 4 nmol x min$^{-1}$ x mg TG$^{-1}$ nur relativ langsam ist. 5. C. glutamicum besitzt ein spezifisches Glutamin-Aufnahmesystem, welches als Na$^{+}$/Glutamin-Symportsystem charakterisiert wurde. Dabei wurde das ungeladene Glutamin als transportierte Spezies bestimmt. Treibende Kräfte des Transports sind die Substratgradienten und das Merbranpotential. Es wurden keine Hinweise auf die Beteiligung von Protonen gefunden. Als kinetische Parameter wurden bei pH 7,0 ein K$_{m}$-Wert von 36 $\mu$M und eine V$_{max}$ von 12,5 nmo1 x min$^{-1}$ x mg TG$^{-1}$ bestimmt.
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